HCT116 L人细胞ATCC

细胞名称：HCT116 L人细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的ljj雷竞技下载无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS3040CINS-1大鼠胰岛瘤细胞

YS3041C人膀胱癌细胞

YS3042CPC-12(高分化)大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞

YS3043CPK15猪肾细胞

YS3044CPK13猪肾细胞

YS3045CNH-6人肾上腺神经母细胞

YS3046CH4-II-E-C3大鼠肝癌细胞

YS3047CL6大鼠骨骼肌成肌细胞

YS3048CMC3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞

YS3049CSW1783人脑星形胶质细胞

YS3050CBecker人脑星形胶质细胞

YS3051CMPC-11小鼠浆细胞

YS3052CCCF-STTG1人脑星形胶质细胞

YS3053CSTO小鼠胚胎纤维细胞

YS3054CCOS-1SV40转化的非洲绿猴肾细胞

YS3055CMarc145猴肾细胞

YS3056CHs821.T巨细胞

YS3057CKURAMOCHI人卵巢癌细胞

YS3058CHs819.T人软骨肉瘤

YS3059CSW1353人骨肉瘤细胞

YS3060CHs822.T尤因氏肉瘤

YS3061CHs863.T尤因氏肉瘤

YS3062CRD-ES尤因氏肉瘤

YS3063CSK-ES-1肉瘤（未分化骨肉瘤、尤文氏肉瘤）

YS3064CSW1088人脑星形胶质细胞

YS3065CHs737.T巨细胞

YS3066Cmousepodocyte肾小球足细胞

YS3067CHs870.T人骨肉瘤细胞

YS3068CHs888.T人骨肉瘤细胞

YS3069CT1-73人骨肉瘤细胞

YS3070CHs706.T巨细胞

YS3071CDaudi人Burkkit淋巴瘤细胞

YS3072CMT-4人急性淋巴母白血病细胞细胞

YS3074CMOLT-4人急性淋巴母细胞

YS3075CT2人淋巴母细胞

YS3076CSH-SY5Y人神经母瘤细胞

YS3077CCA46人burkitt淋巴瘤细胞

YS3078CIMR-32人神经母瘤细胞

YS3079CH9人T淋巴瘤细胞

YS3081CRAJI人Burkitt’s淋巴瘤细胞

YS3082CrNSCs-12神经干细胞

YS3083CJ82人膀胱移行细胞

YS3084CSW780人膀胱移行细胞

YS3085CUM-UC-3人膀胱移行细胞

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YS3092CSK-N-BE(2)SK-N-BE(2)人神经母瘤细胞

YS3093CSK-N-SHSK-N-SH人神经母瘤细胞

YS3094CT98G人多形性恶性胶质瘤T98G[T98-G]

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